本發(fā)明公開了一種豬肝脾臟導(dǎo)管干細(xì)胞分離及三維類器官培養(yǎng)方法，所述方法包括兩步法解離豬肝脾臟組織獲取導(dǎo)管干細(xì)胞和豬肝脾臟類器官三維培養(yǎng)兩個(gè)部分。本發(fā)明基于豬肝脾臟導(dǎo)管干細(xì)胞分離的三維類器官培養(yǎng)方法，解決了豬肝脾臟類器官建立技術(shù)難題，推進(jìn)了類器官技術(shù)在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究中的應(yīng)用。