本發(fā)明提供了一種測定土壤微生物趨化性芯片的制備方法，屬于生物化學(xué)與環(huán)境技術(shù)領(lǐng)域，包括：將含有微腔室、通道和混合區(qū)的芯片進(jìn)行打印，得到光刻掩膜；將光刻膠置于硅片中心后依次進(jìn)行勻膠、烘干，將光刻掩膜與勻好膠的硅片的外邊框?qū)?zhǔn)后進(jìn)行紫外曝光，得到曝光硅片，將所述曝光硅片烘干后用有機(jī)試劑PEGEMEA顯影，再烘干堅(jiān)模，得到陽模；將PDMS預(yù)聚體和固化劑混合后，置于陽模上，靜置后進(jìn)行固化，得到PDMS印章；將PDMS印章進(jìn)行表面親水化改性處理，得到處理印章，將趨化劑加入到處理印章的微腔室后，與載玻片貼合，得到測定土壤微生物趨化性芯片。采用本發(fā)明制備得到的芯片能夠原位、定量和可視化測定土壤微生物趨化性。